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广东联方生物科技有限公司
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合适的固相萃取方法是如何选择的?
ph值对固相萃取的影响
ph值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲,因为吸附剂本身是完全离子化的状态,目标物必须完全离子化才可以-其被吸附剂完全吸附保留。而目标物的离子化程度则与ph值有关。如对于弱碱性化合物来讲,其ph值必须小于其pka值两个单位才可以-目标物完全离子化,而对于弱酸性化合物,其ph值必须大于其pka值两个单位才能-其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲,必须要-吸附剂完全离子化才-目标物的完全吸附,而溶液的ph值必须满足一定的条件才能-其完全离子化。lopez-blanco等测定地表水中的硫i丹α和β异构体,采用固相萃取实现了样品的100倍浓缩富集,使方法检出限达到20ng/l。
固相萃取的保留机制可分为两种:
吸附剂填料保留目标化合物:绝大多数化合物应用此机制,填料保留其目标组分及少量杂质,通过淋洗步骤去除吸附在柱上的少量杂质,然后选择合适的洗脱溶剂把目标组分洗脱下来。
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实验室固相萃取仪操作步骤
针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物全自动固相萃取仪或保留杂质),操作稍有不同。固相萃取操作一般有四步:
1.填料保留目标化合物
活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。
上样----将样品用一定的溶剂溶解,转移入柱并使组分保留在柱上。
淋洗----极i大程度除去干扰物。
洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。
2.填料保留杂质
固相萃取操作一般有三步:
活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。
上样--将样品转移入柱,此时大部分目标全自动固相萃取仪化合物会随样品基液流出,杂质被保留在柱上,故此步骤要开始收集。
洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集,合并收集液。此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。
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固相萃取装置可用于处理固体样品
固相萃取装置由气压室、收集瓶和萃取柱连接部分组成。固相萃取装置主要用于液体样品的前处理,萃取其中的半挥发或者不挥发性化合物,或去除样品中对分离分析造成干扰的杂质,还可用于处理能预先溶解到溶剂中的固体样品。与传统的液液萃取法相比较,可以提高分析物的回收率,且更有效的将分析物与干扰组分进行分离,缩短了样品的预处理过程,操作简单,省时省力。洗脱溶剂:在spe中,洗脱溶剂的选择与目标物性质及使用的吸附剂有关,应根据常见有机i溶剂的极性和洗脱强度,试验过程中可根剧被测物的物理、化学性质选用。
主要特点:
1.高回收率和高富集倍数;
2.操作简单、快速、易于实现自动化;
3.防交叉污染、防雾化真空槽设计;
4.密封性好、一致性高;
5.无相分离操作,易于收集分析物组合,固相萃取装置能处理小体积试样;
6.可配大容量采样器、快速浓缩干燥装置、可批量处理样品;
7.除气室、收集瓶使用特硬加厚玻璃外,其他部件均采用四氟及316不锈钢材料,有较强的抗腐蚀性。